MÉTODO DE KIRBY-BAUER/DIFUSIÓN POR DISCO

FUNDAMENTO

Consiste en depositar discos de diferentes antibióticos, sobre las superficie de una Placa de Petri que contiene agar previamente inoculado con el microorganismo y tras un periodo de incubación de 18-24 horas, observar la zona o halo de inhibición que aparece rodeando al disco de antibiótico.

MATERIALES


Placa de cultivo puro ( en este caso hemos utilizado Klebsiella)
Mechero de alcohol
Asa de siembra
Hisopo
NaCl
Medio de cultivo.
Antibióticos (Ampilicina, Cefotaxima, Tobramicina y Amoxicilina).

PROCEDIMIENTO:

1. Preparar un cultivo de 18 horas, en TSA, en BHIA, de las bacterias que hay que ensayar.

2. Inocular 3-4 colonias en 5 mL de TSA o de SSF e incubar a 37ºC de 5-10 min hasta que la turbidez sea visible.

3. Ajustar turbidez con SSE hasta obtener un equivalente a 0.5 mL de la escala de Mc Farland.
4. Inoculamos la superficie de la placa M-H con un hisopo, sembrando en masa y dando cuatro pases a la placa.

5. Colocar los discos de antibióticos separados 20 mm y a 15 mm del borde de la placa.

- Con aplicador automático.

6. Incubar la placa en posición invertida durante 18-24 horas a 37ºC.


7. Medir los diámetros de las zonas de inhibición. Si hay dos halos juntos se mide en otra dirección.

8. Corroborar si es sensible definitivamente en las tablas que establecen los valores de referencia.

RESULTADOS: 

Sensible a la amoxicilina, tobramicina, cefotaxima y resistente a la ampicilina.