miércoles, 27 de enero de 2016

Epsilon test

FUNDAMENTO

Consiste en un método que combina los métodos de difusión en agar y los de dilución para determinar CMI, mediante lectura directa, determinar la concentración inhibitoria mínima.
Similar a la difusión en agar pero en lugar de discos son tiras de E-test que contienen, en su suoerficie inferior, una gradiente de concentración de antimicrobiano ( equivalente a 15 diluciones ).
Cuando el antibiótico difunde, establece un gradiente de continuo de antimicrobiano a lo largo de la tira y despúes de la incubación se forma una zona elíptica de inhibición del crecimiento.
La CMI se corresponde con el punto donde el borde del área de inhibición del crecimiento intersecciona con la tira.

PROCEDIMIENTO:

1. Inocular  3-4 colonias en 5 mL de TSA o de SSF e icubar a 37ºC d 5-10 min hasta que la turbidez sea visible.
2.Ajustar turbidez con SSF hasta obtener un equivalente a 0.5 de la escala de Mc Farland.
3. Inoculamos la superficie de la placa M-H con un hisópo, sembrando en masa y dando cuatro pases a la placa.
4. Colocamos la tira sobre la superficie de forma gradual, produciéndose de manera inmediata la difusión del antibiótico.





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